© SXC
В рабочей поездке приняли участие специалисты
подведомственного Россельхознадзору ФГБУ «ВНИИКР» Ю.А. Шнейдер и
Г.Н. Мугол Хан.
Институт сельскохозяйственных исследований (IVIA) является
автономным органом при Департаменте сельского хозяйства, рыболовства и
продовольствия Испании.
В IVIA разрабатываются новые методы исследований, результаты
которых применяются на практике в других институтах и лабораториях. Лаборатория
вирусологии IVIA представлена 2 подразделениями: в первом изучаются вирусы и
фитоплазмы на косточковых, семечковых, цитрусовых культурах, во втором — вирусы
овощных, травянистых и декоративных культур.
Одним из направлений деятельности лаборатории вирусологии
является создание наборов для иммуноферментного анализа к вирусу шарки слив, а
также разработка и получение специфических антител к различным штаммам PPV.
Руководителем лаборатории является ведущий мировой вирусолог
Мариано Камбра — автор диагностических протоколов ЕОКЗР и МККЗР по вирусу шарки
слив (Plumpoxvirus), а также один из руководителей проекта SharCo, цель
которого — изучение свойств, распространения и методов диагностики вируса шарки
слив.
В ходе стажировки специалистами Россельхознадзора
протестированы образцы косточковых культур, зараженных разными штаммами вируса
шарки слив с использованием 11 тест-систем для иммуноферментного анализа с
поликлональными и моноклональными антителами, произведенными в IVIA, а также Bioreba
(Швейцария) и новыми разработанными антителами 4В7С4 (Италия). Образцы
исследовались на наличие штаммов Winona, Cherry, T, ElAmar вируса шарки слив.
По результатам анализа подтверждено заражение новым штаммом PPV-CR (CherryRussian)
двух образцов вишни из Саратовской области, выявленным сотрудниками лаборатории
вирусологии ФГБУ «ВНИИКР» в 2011г.
Также все образцы проанализированы методом Real-timeRT-PCR,
с использованием новой технологии, разработанной в лаборатории вирусологии в IVIA.
Данная модификация не требует выделения РНК из образца растения, а
продолжительность анализа составляет примерно 3 часа.
Освоены новые методы выделения ДНК и РНК фитоплазмы
пролиферации яблони CandidatusPhytoplasmamali и фитоплазмы истощения груши CandidatusPhytoplasmapyriиз
растительной ткани яблони и груши с помощью набора DNeasy Plant Mini Kit
(Qiagen, Германия) и набора UltraClean Plant RNA Isolation Kit (MO-BIO, USA).
Для выявления фитоплазмы истощения груши CandidatusPhytoplasmapyri
был применен метод ПЦР «в реальном времени» с универсальными и специфическими
праймерами.
Кроме того, в процессе стажировки освоен метод закладки на длительное
хранение лиофилизированных растительных образцов, а также методы хранения
образцов растительного происхождения без применения заморозки, так называемый
метод «ScreenPrint» — оттиск поперечного среза части растения на подготовленной
бумаге.
|
