Официальный сайт
Федеральной службы по ветеринарному и фитосанитарному надзору
(http://www.fsvps.ru)

*

Россельхознадзор / Пресса о нас

1 августа 2024 г.

Разработка методики определения макролидного антибиотика спирамицина методом иммуноферментного анализа

Спирамицин – многокомпонентный макролидный антибиотик, который широко применяется в качестве ветеринарного препарата и кормовой добавки. Спирамицин высокоактивен в отношении грамположительных бактерий и некоторых видов микоплазмы, что объясняет его широкое применениев лечении токсоплазмоза, инфекций мягких тканей у крупного рогатого скота, свиней, птиц и овец. Остатки спирамицина в пищевой продукции, выявляемые вследствие неконтролируемого использования антибиотика и игнорирования времени выведения препарата, приводят к развитию аллергических и токсических реакций у потребителей. Кроме того, остатки спирамицина в продуктах животного происхождения приводят к созданию устойчивых к антибиотикам штаммов бактерий. Таким образом, актуальность разработки методов определения спирамицина определяют установленные нормы содержания антибиотика в пищевой продукции для защиты здоровья потребителей. Иммуноферментный анализ является скрининговым, быстрым и менее трудоемким методом оценки остаточного содержания загрязняющих веществ по сравнению c хроматографическими методами. Для разработки методики определения спирамицина методом твердофазного конкурентного иммуноанализа получены иммуноген – коньюгат спирамицина с бычьим сывороточным альбумином (БСА), поверхностный коньюгат спирамицина с БСА, коньюгат вторичных антител с пероксидазой хрена и коньюгат спирамицина с пероксидазой хрена. Коньюгаты спирамицина с БСА получены путем прямого взаимодействия белка и спирамицина с дальнейшим восстановлением тетраборатом натрия. Рассмотрены две схемы конкурентного иммуноферментного анализа - прямая (одна стадия) и непрямая (две стадии). В случае прямой схемы анализа конкурентное взаимодействие антигенане наблюдалось, поэтому для определения целевого аналита выбрана непрямая схема конкурентного иммуноферментного анализа с установленными оптимальными параметрами (время проведения анализа и условия сорбции иммунореагентов). Таким образом, разработана высокочувствительная методика определения спирамицина методом непрямого конкурентного иммуноферментного анализа. Предел обнаружения и диапазон линейного обнаружения составил 0,5 нг/мл и 1–100 нг/мл, соответственно. При оценке специфичности разработанной методики процент перекрестного реагирования с другими антибиотиками группы макролидов составил менее 1%. Время анализа составило около 1,5 часа. Для оценки эффективности разработанной методики планируется апробация системы в образцах молока и мяса. 

Источник: Сборник "ХИМБИОSEASONS 2024"
Оригинал: https://www.elibrary.ru/download/elibrary_67978227_72833230.pdf

Россельхознадзор / Пресса о нас / http://www.fsvps.ru/fsvps/press/805946.html