Ежегодно справочная лаборатория по африканской чуме свиней (CISA-INIA, Мадрид, Испания) Европейского Союза (ЕС) для проверки компетенции и уровня подготовки специалистов диагностических лабораторий ЕС и других заинтересованных стран организует проведение сличительных испытаний по диагностике АЧС.

В 2016 году референтная лаборатория по АЧС подведомственного Россельхознадзору ФГБУ «Федеральный центр охраны здоровья животных» (ID 45) второй год подряд приняла участие в данных сличительных испытаниях. Для проведения исследований ФГБУ «ВНИИЗЖ» было получено две панели шифрованных образцов проб (сыворотка (S1-S12) и суспензии органов (T1-T4)) для выявления антител и генома вируса АЧС используемыми в лаборатории методами. Следует отметить, что для проведения испытаний Справочной лабораторией ЕС были отобраны пробы от животных заражённых вирусом АЧС различных степеней вирулентности, различных генотипов, отобранные в различные сроки после заражения и от животных с различными формами течения: острой и хронической.

Российские специалисты для проведения испытаний по выявлению генома вируса АЧС методом полимеразной цепной реакции в режиме реального времени использовали тест-системы «LSI VetMAx» (пр-ль ThermoFisher) и разработанную в референтной лаборатории ФГБУ «ВНИИЗЖ» в рамках выполнения НИОКР тест-систему для диагностики АЧС методом ПЦР в режиме реального времени. В рамках испытаний предполагалось провести исследования 12 образцов сыворотки и 4 образцов патологического материала от инфицированных и неинфицированных свиней (рис.1а и 1 b).

Рисунок 1а.

Рисунок 1b.

Результаты исследований специалистов ФГБУ «ВНИИЗЖ» показали, что в 5-ти пробах сыворотки крови (S1,S2,S4,S8 и S9) и 3-х пробах патологического материала (T1,T2 и Т3) присутствует геном (ДНК) вируса АЧС.

При исследовании в референтной лаборатории по АЧС ФГБУ «ВНИИЗЖ» сывороток крови методом иммуноферментного анализа (ИФА) с использованием тест-системы для выявления антител «ID Screen» (пр-ль IDVet) и экспериментальной тест системы на основе комплексного антигена разрабатываемой в референтной лаборатории по АЧС в рамках выполнения государственного задания, получены следующие результаты (рис. 2а). Подтверждение результатов проводилось рекомендованным МЭБ методом иммуноблотинга. (рис. 2b):

Рисунок 2а.

В результате исследований специалисты ВНИИЗЖ определили, что в 5-ти образцах сывороток (S4,S5, S9,S10 и S11) присутствуют специфические антитела к вирусу АЧС. Результаты иммуноблотинга как высокоспецифичного метода подтвердили эти результаты (рис. 2b).

Рисунок 2b.

Таким образом, по результатам комплекса различных методов исследований, используемых в референтной лаборатории по АЧС ФГБУ «ВНИИЗЖ», российские специалисты успешно прошли  сличительные испытания, правильно поставив диагноз для всех зашифрованных образцов (рис 3), тем самым подтвердив свою высокую методическую грамотность и квалификацию.

Рисунок 3.

Европейские коллеги высоко оценили квалификацию сотрудников, диагностические наборы и тест-системы, используемые для диагностики в референтной лабораторией по АЧС ФГБУ «ВНИИЗЖ»: «Для каждого зашифрованного образца был дан правильный результат, в соответствии с нашими ожиданиями. На основании данных результатов, Справочная лаборатория ЕС установила, что диагностические процедуры, используемые в вашей лаборатории соответствуют необходимому уровню для проведения диагностики полевого материала».

Положительные результаты использования в испытаниях разработанной ФГБУ «ВНИИЗЖ» диагностической тест-системы для диагностики африканской чумы свиней методом полимеразной цепной реакции в режиме реального времени подтвердило перспективность внедрения данной тест-системы в лабораторную практику ветеринарных учреждений Российской Федерации.